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关于小鼠ELISA试剂盒的操作方法或许你了解的还不够多

更新时间:2021-09-26      点击次数:1018

    小鼠ELISA试剂盒--小鼠信号转导子和转录激活子1(STAT1)ELISA试剂盒是经开元旗牌专业的技术人员检定并得到国内各大高校实验团队,课题组认可的科研用ELISA试剂盒,该产品灵敏度高,特意性强,检测测定样本的结果稳定准确,做科研实验找我们就对了。

    小鼠ELISA试剂盒的操作方法:

    双抗体夹心法:

    1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

    2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

    3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。

    4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。

    5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

    6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

    间接法:

    1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;

    2.次日洗涤3次;

    3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;

    4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;

    5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;

    6.’最后一遍用DDW洗涤。

    其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
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