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让专业人员告诉你大鼠ELISA试剂盒的样品处理和保存方法

更新时间:2021-07-14      点击次数:973

    大鼠ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠活性氧(ROS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠活性氧(ROS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

    大鼠ELISA试剂盒的样品收集、处理及保存方法:

    1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

    2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

    3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

    4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

    5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    自备物品:

    1.酶标仪(450nm)

    2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3.37℃恒温箱
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