人SV40转染成骨细胞HFOB1.19性能参数科研

在进行细胞传代培养的时候，胰蛋白酶作用的时间是在1～3分钟，由于我有好几个培养瓶（4个以上）的细胞都需要进行传代操作，那么就胰酶消化这一步而言，我是该一个培养瓶一个培养瓶这么分开做，还是可以几个同时做呢？同时做我怕后来操作的培养瓶中的细胞消化过度啊！一个一个的做会不会又太费时呢？

培养基 D-MEM/F-12培养基(GIBCO,货号12400024，添加L-glutamine 150mg/L, NaHCO3 1.5g/L)，90%；0.3mg/ml G418；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：33.5摄氏度。
生长特性 贴壁生长

1、一个一个做！防止污染，和消化细胞时间的不均匀。

2、原则上，为了避免细胞系之间的污染，应该一个一个的做。但是如果你能保证无菌操作的原则，人SV40转染成骨细胞HFOB1.19性能参数科研也能把握好各种贴壁细胞系消化的时间，是可以同时做，这样效率高。建议你刚开始一个一个的做，熟练以后根据具体情况决定如何做。

3、4个可以同时做，时间到了用移液枪给4个瓶加含血清的培养基终止就行。

4、新手的话强烈建议一个一个处理细胞，特别是消化，除非你养的细胞对消化都不敏感，不然很容易消化过度或者不到位。另外同时处理多个细胞容易出现细胞间交叉污染，一旦污染基本没救，比细菌污染还要麻烦。

5、刚开始还是一个一个来，人SV40转染成骨细胞HFOB1.19性能参数科研消化的时间与细胞的来源有很大关系，贴壁性强的细胞，需要消化的时间较长。一般除了贴壁性强的癌细胞外，细胞消化时间1-3min，还有胰蛋白酶的浓度有关系，浓度高的消化时间要短一些，不然会消化过了，对于细胞的生长不好。你可以在分散打入胰蛋白酶时，轻晃培养瓶，在显微镜下看见细胞开始变亮，皱缩，卷边的时候就加入培养液或者血清终止消化。

失败的关键原因还是细胞复苏的时候没有开元旗牌解冻的缘故，后一次成功是因为注意到这个问题。细胞的复苏及冻存遵循慢冻速融原则，如果hFOB 1.19人SV40转染成骨细胞取出后没有在尽可能短的时间里解冻的话细胞内部会产生很多冰晶对细胞就有致命的损失了。另外，细胞的确应该是在液氮条件下保存，如果液氮可以保存1-2年的细胞，放-80度保存恐怕不到三个月就不行了，并且状态会很差。ZYC3821    神经前体细胞培养基    NPrCM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3822     神经细胞培养基    NM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3823     少突胶质前体细胞培养基    OPCM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3824     球状少突细胞培养基    OsM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3825     角质细胞培养基    KM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3826     角质细胞培养基（确定）     KM-d    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3827    成纤维细胞培养基    FM-sf    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3828    扁桃体上皮细胞培养基    TEpiCM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3829     口腔角质细胞培养基    OKM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3830    结肠上皮细胞培养基    CoEpiCM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3831     支气管上皮细胞培养基    BEpiCM    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 

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使用权限 A类注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的*培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流。
培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
2）公司细胞资源中心承诺尽zui大努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，中心不保证其准确性。
3）从文献等处引用的信息本中心未进行核实，仅供参考。
 

 
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。