小鼠胰岛β细胞Min6科研说明书

细胞传代（以下步骤适用于10cm皿）
①细胞培养至密度达80%以上时即可传代，先将细胞培养基取出3mL用15mL离心管装好，其他培养基全部吸干舍弃；
②培养皿加入2-3mL无菌PBS，轻轻晃动皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍弃；
③加入1mL胰酶，轻轻晃动皿，使胰酶浸没到皿底所有部位，将皿盖好放入培养箱中消化；
④3min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞不再贴壁，即可加入*步收集的培养基混匀；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至不贴壁为止；
⑤将细胞悬液均匀分成几份，分别加入不同培养皿中，补加新培养基后放回培养箱培养。
 

产品介绍

生长特性 贴壁

形态 梭形

培养基 90% RPMI-1640+10%FBS

生长条件 95%空气+5% 二氧化碳   37摄氏度

冻存条件 90％FBS ＋10％DMSO

污染检测 支原体、细菌、酵母和真菌检测结果为阴性

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；

（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞培养详细步骤

收到常温细胞后处理方法

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
２. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养２－４小时，以便稳定细胞状态．

３. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，贴壁特性(贴壁/悬浮），细胞形态，所用基础培养基．血清比例，所需细胞因子，传代比例，换液频率等．

４. 静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检，拍照，记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据)建议细胞传代培养后，定期拍照，记录细胞生长状态．

５. 贴壁细：若细胞生长密度超过８０％，可正常传代，若未超过８０％，移除细胞培养瓶内培养基，预留５ＭＬ左右继续培养，直至细胞密度达８０％左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松．

６. 悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至５０ＭＬ无菌离心管内，１２００rpm离心５min,离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入５ml培养基吹打．重悬．镜检时，基细胞密度超过８０％，可将细胞悬液分至２个细胞培养瓶内培养，补加培养基至５ml;若细胞密度未超过８０％，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达８０％左右时再进行传代操作．

方     式： 详询经理

小鼠胰岛β细胞Min6科研说明书

 内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的*培养基。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流。
培养温馨提示：
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
2）公司细胞资源中心承诺尽zui大努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，中心不保证其准确性。
3）从文献等处引用的信息本中心未进行核实，仅供参考。
 

 
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。